艾滋病阳性患者恶性肿瘤化疗期间T细胞检测

 

 

 

 1 对象与方法

 

 

 

1. 1 对象 收集于 2010 年 1 月－2016 年 12 月在 本院就诊的各类肿瘤患者，共 57 620 例，其中男 28 412例，女 29 208 例; 年龄 3 ～ 86 岁，平均( 47± 5. 4) 岁。经本省/市疾病控制中心确认 HIV 阳性者 116 例，其中 78 例接受放化疗， 60 例临床资料完整 ( 包括肺癌13 例;头颈部肿瘤12 例;乳腺癌7 例、宫 颈癌 6 例、阴茎癌 2 例; 非霍奇金淋巴瘤、肠癌、胃 癌、食管癌各 5 例) ，故对其进一步研究，其中男 33 例，女 27 例;平均年龄 53 岁， 53 岁以上 34 例， 53 岁 以下 26 例。同期的 60 名对照组( 包括肺癌 10 例; 头颈部肿瘤 13 例;乳腺癌 8 例、宫颈癌 7 例、阴茎癌 2 例;非霍奇金淋巴瘤、肠癌、胃癌、食管癌各 5 例) 来源于确诊后治疗前的患者血液标本，其中男 32例，女 28 例;平均年龄 55 岁， 55 岁以上 32 例， 55 岁 以下 28 例;60 例健康对照组来源于同期于本院行 健康体检者，其年龄、性别与实验组一致。三组均未 合并糖尿病、高血压等基础疾病。入组标准: ①组织 病理学证实为恶性肿瘤并 HIV 阳性者; ②无精神、 神经方面障碍，认知能力可; ③PS 评分( ECOG) 为 0、 1 或 2 分; ④无颅内放疗史; ⑤无严重的过敏史; ⑥愿意签署知情同意书; ⑦愿意提供血标本。排除 标准: ①孕妇或哺乳期病人; ②有生育能力且不愿意 采用避孕措施者; ③严重的合并症: 极高危高血压、 严重肺功能损伤、大面积心肌梗塞、心功能≥Ⅱ级、 精神病史和严重糖尿病; ④传染病活动期; ⑤目前或 入选前 4 周内参加其他临床试验; ⑥同时用其他抗 癌药治疗。

 

 

 

 1. 2 T 细胞亚群检测 标记样本管和对照管，样本 管加 CD3/CD4/CD8 三色荧光试剂20μL，相应对照 管加 IgG-FITC/IgG-PE/IgG-PC5 抗体 20μL; 每管加 待侧样本全血 100μL，混匀，室温避光孵育 20min; 加 Opticy le C 溶血素500μL，室温避光放置10min; 加 PBS 试剂500μL，混匀，室温避光放置10min;上 机分析。 1. 3 统计学处理 用 SPSS13. 0 统计学软件。对照 组与放化疗前后血液标本中 CD3+、 CD3+ CD4+、 CD3+CD8+比值的变化采用 One-way ANOVA 方差分 析，用( x±s) 表示，两两比较采用 LSDt 检验; ChiSquare 检验分析影响 CD3+ CD4+ /CD3+ CD8+比值水 平的因素。P＜0. 05 为差异有统计学意义。

 

 

 2 结果

 

 

2. 1 恶性肿瘤患者放化疗前后血清中 T 淋巴细胞 亚型水平 见表 1。60 例临床资料完整的患者中，男30 例，女30 例，与健康对照组及HIV 阴性患者比 较， HIV 阳性的肿瘤患者外周血 CD3+、 CD3+CD4+细 胞比例及 CD3+ CD4+ /CD3+ CD8+比值明显降低，差 异有统计学意义( P＜0. 01) ，而 CD3+CD8+细胞比例 明显增高，差异有统计学意义( P＜0. 01) ; 与放化疗 前比较，放化疗后 CD3+、CD3+ CD4+ 细胞比例及CD3+CD4+ / CD3+ CD8+比值明显降低，差异有统计 学意义( P ＜0. 01) ，而 CD3+ CD8+ 细胞比例明显增 高，差异有统计学意义( P＜0. 01) ，CD4+细胞在 HIV 阳性患者中的比例较健康对照组及 HIV 阴性患者 明显降低， HIV 阳性组放化疗后较放化疗前升高，差 异有统计学意义( P＜0. 05) 。

 

 

 

2. 2 恶性肿瘤患者放化疗后 CD3+ CD4+ /CD3+ CD8+比值水平的影响因素分析 见表 2。CD3+ CD4+ /CD3+CD8+比值与恶性肿瘤患者放化疗后性 别、病理类型、 KPS 评分、有无淋巴结转移均无相关 性( P 均＞0. 05) ，而与患者年龄、肿瘤浸润深度及临 床分期相关( P 均＜0. 05) 。

 

3 讨论

 

 

HIV 感染导致机体的免疫功能损伤，免疫监视 功能低下，肿瘤的发病率明显增加［5-6］。T 淋巴细胞 是构成机体免疫功能的重要因素， T 淋巴细胞来源 于骨髓的多能干细胞( 胚胎期则来源于卵黄囊和 肝) 。在人体胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多 能干细胞或前 T 细胞迁移到胸腺内，在胸腺激素的 诱导下分化成熟，成为具有免疫活性的 T 细胞。成 熟的 T 细胞经血流分布至外周免疫器官的胸腺依 赖区定居，并可经淋巴管、外周血和组织液等进行再 循环，发挥细胞免疫及免疫调节等功能［7-8］。T 细胞 依其功能不同分为 CD4+ T 淋巴细胞( Th 细胞) 和 CD8+T 淋巴细胞( Ts 细胞) 两个亚群。而 CD3+T 淋 巴细胞代表了 T 淋巴细胞的总水平，大致为 CD4+和 CD8+T 淋巴细胞数之和，反映机体总的细胞免疫状 态［9-10］。文献报道 CD4+ T 淋巴细胞能通过 γ 干扰 素( IFN-γ) 依赖途径直接对肿瘤产生细胞毒作 用［11-12］。正常情况下， T 淋巴细胞亚群之间的细微 平衡是维持免疫系统内部环境稳定的一个中心环 节，机体维持正常的免疫功能状态，有赖于各种免疫 细胞之间的相互协作或相互制约，以产生适度的免 疫应答，使之即能清除异物抗原，又不致损伤机体组 织，若 T 淋巴细胞总数 CD3+ /CD3+CD4+ /CD3+CD8+T 淋巴细胞比值异常时，即可视为免疫调节功 能紊乱，易发生肿瘤或自身免疫病［13-14］。近年来的 研究证实，当不同的 T 淋巴细胞亚群在数量上和功 能上发生异常时，即可导致机体免疫功能紊乱并诱 发一系列病理变化，其中包括肿瘤的发生与发 展［15-16］。然而关于恶性肿瘤合并 HIV 患者 T 细胞 的表达情况目前国内外研究很少。本研究发现 HIV 阳性合并肿瘤患者外周血 CD3+、 CD3+ CD4+细胞比 例及 CD3+CD4+ / CD3+CD8+比值明显低于健康对照 组水平，而 CD3+ CD8+细胞比例明显高于健康对照 组;在放化疗前后比较，放化疗后 CD3+、 CD3+ CD4+ 细胞比例及 CD3+CD4+ / CD3+CD8+比值明显低于放 化疗前水平( P＜0. 01) ，而 CD3+CD8+细胞比例明显 高于放化疗前; 恶性肿瘤患者放化疗后 CD3+CD4+ / CD3+CD8+比值与性别、 KPS 评分、病理类型、有无淋 巴结转移均无关，而与患者的年龄、肿瘤浸润深度及 临床分期相关。本研究证明 T 细胞亚群在数量上 和功能上发生异常时即可引起机体的免疫功能紊 乱，导致癌症的发生，同时放化疗后机体的 CD3+ CD8+免疫被激活，以上研究结果提示 HIV 阳性的肿 瘤患者细胞免疫功能紊乱，观察检测其 T 细胞亚群 水平对疾病的诊断及预后判断具有积极意义。